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interchim FT-664790說明書

更新時間:2020-09-07      點擊次數:2147

 

 

interchim FT-664790說明書

pNPP溶液(ELISA用AP底物)

描述

Uptima pNPP底物是用于檢測堿性磷酸酶(AP)的顯色底物,產生黃色可溶性副產物。經典用于ELISA技術。該處方針對較長的有效期和良好的批間重現性進行了優化。在含有高純度和穩定劑的對硝基苯基磷酸鹽(pNPP)混合物的*小瓶中對其進行調節。與堿性磷酸酶結合物反應后,產生深黃色,可在405 nm處讀取。Uptima提供了需要準確和靈敏結果的優化處方。該底物不適用于免疫化學或蛋白免疫印跡法(要求Uptima提供合適的替代底物)。

 

 

產品編號: UP664790,200 mL UP664791,500 mL UP664792,1 L

 

靈敏度 Uptima pNPP底物非常敏感,產生的背景非常低。

在大多數應用中,Uptima pNPP通常優于其他可用的AP底物,并且通常與過氧化物酶相似的顯色檢測系統。

 

穩定性 底物在 + 4 ℃下可穩定儲存30個月以上。

 

儲存條件 + 4 ℃下避光儲存。(L)

pNPP底物對某些儲存和使用條件敏感:

1. 避免直接光暴露或接觸污染物質。

2. 請勿直接從瓶中移?。菏紫葘⑺枞芤貉b入潔凈容器中

3. 請勿將瓶子打開  過長

4. 采用冷凍凝膠包運輸。請勿冷凍。

 

 

建議方案

Uptima pNPP為即用型。只需讓所需量達到室溫即可。

 

1. 可根據您的標準方案進行ELISA試驗。*清洗微孔板,以除去未結合的堿性磷酸酶標記探針(抗體、凝集素、核苷酸……)。沖洗不充分可能導致背景不理想。Uptima建議在PBST(NaCl 150 mM、磷酸鹽20 mM、Tween20®0.1%,pH 7.5)中清洗4次。

2. 向各微孔板小孔中加入150µl pNPP底物。緩慢攪拌以混勻。在 + 37 ℃下避光孵育30分鐘。立即顯色。

注:Uptima pNPP溶液為即用型。請勿稀釋。

可根據檢測系統調整每孔體積和孵育持續時間。

如果染色過快或過強,應稀釋一抗或二抗,或將染色時間縮短至15 min。不建議稀釋pNPP底物

3. 在405 nm處直接讀取吸光度,或在停止步驟(第4點)后讀取,以獲得更準確的結果。請勿比較停止和未停止時獲得的值。

4. 反應終止(可選):在每個孔中加入100µl終止液(1 MNaOH)。顏色保持黃色,但不波動,允許在2小時或更長時間內在405 nm處讀數。

 

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