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angioproteomie cAP-0010說明書

更新時(shí)間：2019-12-09 點(diǎn)擊次數(shù)：2547

angioproteomie cAP-0010說明書

人視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞

Human Retinal Microvascular Endothelial Cells

Item#:

cAP-0010

Size	Price
1.0 Frozen Vial	$600.00

訂單信息
產(chǎn)品名稱	人視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞（HRMVEC）
目錄號(hào)	cAP-0010
產(chǎn)品格式	冷凍瓶
細(xì)胞數(shù)量	> 5x10 [5]個(gè)細(xì)胞/小瓶
一般信息HRMVEC（cAP-0010）細(xì)胞是從正常人視網(wǎng)膜組織中分離出來的。將細(xì)胞裝在冷凍小瓶中（第3代提供細(xì)胞）。推薦使用內(nèi)皮細(xì)胞生長培養(yǎng)基（EGM，包含10％的血清和生長補(bǔ)充劑，cAP-02）進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)，按照以下詳細(xì)方案進(jìn)行培養(yǎng)時(shí)，這些細(xì)胞的小平均群體倍增水平> 20。
細(xì)胞的表征
1.	細(xì)胞質(zhì)VWF /因子VIII免疫熒光陽性> 95％
2.	免疫熒光檢測(cè)Di-I-Ac-LDL細(xì)胞質(zhì)攝取> 95％陽性
3.	細(xì)胞質(zhì)PECAM1免疫熒光陽性> 95％
4.	HRMVEC對(duì)HIV-1，HBV，HCV和支原體呈陰性
產(chǎn)品使用情況單元僅供研究使用。
用干冰包裝運(yùn)輸冷凍瓶。
到達(dá)細(xì)胞的處理當(dāng)您收到裝有冷凍小瓶中的細(xì)胞的干冰包裝時(shí)，請(qǐng)將冷凍小瓶中的細(xì)胞轉(zhuǎn)移到-80C冷凍室中進(jìn)行短期保存，或者將其移入液氮罐中進(jìn)行長期保存。
解凍細(xì)胞和亞培養(yǎng)的協(xié)議
a）	T25燒瓶的預(yù)涂-將2ml快速涂層溶液（cAP-01）加入T25燒瓶中，以覆蓋燒瓶的整個(gè)表面，5分鐘后，通過抽吸處理過量的涂層溶液，準(zhǔn)備使用燒瓶（盡管可以使用包含其他細(xì)胞外基質(zhì)（即明膠，膠原蛋白和纖連蛋白）的溶液，但請(qǐng)確保事先優(yōu)化條件）。
B）	首先在37°C水浴中解凍冷凍的細(xì)胞瓶，然后將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到裝有10ml cAP-02培養(yǎng)基的預(yù)涂T25燒瓶中，細(xì)胞通常會(huì)匯合過夜，并準(zhǔn)備進(jìn)行傳代。
C）	要傳代細(xì)胞，請(qǐng)?jiān)赥25燒瓶中用5ml HBSS（RT）沖洗兩次。然后將2ml胰蛋白酶/ EDTA（RT）（cAP-23）加入一個(gè)T25燒瓶中；吸出后在20秒內(nèi)輕輕處置過量的胰蛋白酶/ EDTA溶液。
D）	將T25燒瓶中的細(xì)胞在室溫或37°C下放置1分鐘（大多數(shù)細(xì)胞通常會(huì)在1-2分鐘內(nèi)從表面分離；或在顯微鏡下監(jiān)控細(xì)胞，直到大多數(shù)細(xì)胞被聚集起來，然后輕輕敲擊燒瓶）靠在工作臺(tái)表面上，在顯微鏡下監(jiān)控時(shí)，細(xì)胞會(huì)在燒瓶表面上移動(dòng)。
E）	加入5ml胰蛋白酶中和緩沖液，并通過800g離心5分鐘使細(xì)胞旋轉(zhuǎn)。
G）	用10或15ml cAP-2培養(yǎng)基重懸細(xì)胞沉淀，然后將5 ml分別轉(zhuǎn)移到2或3個(gè)預(yù)涂的T25燒瓶中（對(duì)于1/2至1/3的繼代培養(yǎng)比例）。
H）	每2或3天更換培養(yǎng)基，通常在7天內(nèi)（當(dāng)以1/3的比例分裂時(shí)）融合細(xì)胞。
I）	要準(zhǔn)備靜態(tài)細(xì)胞，當(dāng)細(xì)胞幾乎匯合時(shí)，請(qǐng)?jiān)趯?shí)驗(yàn)前約8-12小時(shí)用含有0.5％FBS的內(nèi)皮基礎(chǔ)培養(yǎng)基（EBM，cAP-03）代替cAP-02。

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